討論下制備液相色譜儀出現“堵”“漏”怎么辦？

　　制備液相色譜儀常見的故障：一是堵，二是漏。下面這兩點分別展開討論。

　　一、先討論“堵”的情況。

　　“堵”的表現現象是柱壓異常升高，直接原因是流路不暢。堵塞的主要位置是在色譜柱的前端，主要原因是流動相里有雜質，雜質的主要來源是細菌。

　　1、“堵”的原因：配制流動相時細菌污染。

　　首先，我們要認識到，一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態微粒雜質，也能在液相流路系統前端的過濾頭上排除，真正容易引起問題的，是水中的細菌。

　　新制備的純水在室內放置幾天會長菌，而這些細菌雖然肉眼不可見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報廢。這是在配制流動相時造成的細菌污染的原因，解決它的方法很簡單，確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦：

　?。?）理想的方式當然是購買實驗室純水機，既方便又可靠，質量也放心。缺點是價格不菲。

　?。?）成箱購買市售品牌純凈水，如，500mL一支的怡寶或娃哈哈，這些水的質量足以應付液相色譜的要求。先隨機抽取一支做一下細菌平板實驗，待菌落數合格方可使用。這樣每次只要單獨開一支即可，也很方便。每次成本2元左右。

　　這里特別指出一個細節：在絕大多數書本上，凡談到配制流動相都會談到后面有一個過濾的步驟。但是從我們長期使用的實際效果來說，只要能保證水的質量，這一步*可以也應當去除。

　　原因有以下三點：

　?。?）流動相過濾在理論上有好處，但是，實際操作時由于不可能做到專瓶，反而容易造成的交叉污染，對于配比復雜的流動相影響更大。

　?。?）流動相過濾在經濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多元，且過濾器*是比較容易損壞的設備。主要是過濾片的成本太高，一片要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算，過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本。

　?。?）流動相過濾對于工作效率成本不劃算。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備、使用、用后清洗，晾干的過程，至少也有一個小時的時間。這個成本也不能忽視。

　?。?）在實際工作未發現流動相不過濾會對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時間沒有做過流動相過濾的工作，但是和國內同行相比較，在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長的。

　　2、“堵”的原因：使用流動相時的細菌污染。

　　指的是：

　　流動相剛開始沒有長菌，在使用時卻產生了細菌污染。這主要是在使用制備液相色譜儀時的一種不良使用習慣造成的。

　　3、“堵”的原因：不適當操作。

　　常見問題的有以下幾種：

　　（1）在更換零件時選擇的型號有誤，接口不是很匹配，在擰緊的時候產生變形而使得管路堵塞。

　　（2）樣品處理液凈化得不干凈，長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。

　?。?）在使用手動六通閥時，有些人可能由于手勁小的原因，轉動的不到位，于是造成流路形成了死堵，壓力快速升高超過警戒值。

　　（4）在使用金屬管路作出廢液管時，應當注意先在廢液瓶中放一些水，并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液，在停機時可能在出口端結晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見，但卻的確發生過。

　　以上便是今天關于討論下制備液相色譜儀出現“堵”“漏”怎么辦的全部分享了，希望對大家今后使用本設備能有幫助。